目前常用的诊断类试剂盒涉及到的核酸纯化用试剂盒一般都采用离心柱法或者磁珠法进行核酸纯化,在自动化平台上采用磁珠法较多,手工使用离心柱法较多。两种方法从原理上来说都是利用了高盐条件下核酸和二氧化硅表面结合在低盐下和二氧化硅表面分离的这样的一个机理将体系内的核酸与蛋白、多糖等其他杂质分离开来。因此不论哪种方法含有杂质的液相部分分离的是否彻底对定量的结果是有明显的影响的。
采用柱法去除杂质的过程中会需要经历反复的离心过程(常用离心条件为:8,000rpm~14,000rpm,1-15min,4度/常温的选择与离心时间有关),离心的效果和最后核酸的得率密切相关。
此外,在采用过柱法进行核酸纯化时,在离心的过程中的生物安全也是一个必须要重视的问题。
你一定要了解的Eppendorf气密性转子,为什么必须是气密性转子气溶胶是由悬浮在空气中的液滴和/或固体颗粒组成的胶体系统,在世界上几乎无处不在,所以如何防止有害气溶胶的吸入至关重要。常见的实验室活动非常容易产生气溶胶,最重要的是有害的生物气溶胶。有许多记录在案的实验室获得性感染病例是由于吸入传染性气溶胶造成的,这些感染可能的严重程度取决于病原体,并对实验室中的每个人都构成健康危害。
在所有的日常实验室工作中,离心是气溶胶的一个来源,你必须采取适当的预防措施时,工作的传染性或有害物质。在离心过程中,气溶胶可能在高速旋转过程中逸出,例如,微生物没有在离心机中充分密封,旋转无盖样品或管泄漏或断裂。
离心过程中如何最大限度的避免有害气溶胶的吸入,除了考虑加载容器的容积、材质,转子以及荷载样品的吊篮在防止离心机外气溶胶的形成中起着重要的作用,选择具有预防措施的离心机,配合适当的个人防护设备才能将风险降到最低。
Eppendorf拥有完整的台式离心机产品线,可以满足核酸提取所需的所有条件,同时给你可靠保护:
> 可以满足不同实验通量的需求
> 可以满足不同耗材的离心需求(1.5/2.0ml离心管,PCR
8连管,PCR板,微孔/深孔板,采血管等)
> 可以满足试验需求的高速离心力(最高可达30,130×g(17,500 rpm))
> 可以选配气密性转子,保证实验室环境和实验人员的安全
> 气密性转子盖具备QuickLock快速锁紧功能,简单快速
>
可配气密性吊篮。在处理病毒样品过程中如果发生意外,可以将吊篮先转移至安全柜内再进行操作,避免发生实验室污染事故
应用于核酸提取以及PCR样品准备,以下产品将是您的可靠又得力的助手。
F-45-12-11固定角转
> 适用于 12 × 1.5/2.0 mL 离心机
F-55-16-5固定角转
> 适用于 2 × PCR 联管
中小通量(<12个样本),可置于生物安全柜中
> 12 孔小型离心机,精巧造型,节省空间,非冷冻型
> 适用 1.5/2.0 mL 离心管(12x)
> 适用PCR 8 排管(2x)
> MiniSpin 最大离心力 (RCF)可达12,100 × g(13,400 rpm)
> MiniSpin plus 最大离心力 (RCF)可达 14,100 × g(14,500 rpm)
FA-45-24-11气密性固定角转
> 最大相对离心力: 21,130 × g (15,000 rpm)
> 最大容量: 24 × 1.5/2.0 mL
> 气密性,离心危险样品更安全
F-45-18-11-Kit 固定角转
> 最大相对离心力: 18,111 × g (15,000 rpm)
> 最大容量: 18 × 离心柱或 1.5/2.0 mL 离心管
> 独有边缘加宽设计,防止开盖离心时,管盖碎裂
F-45-32-5-PCR 固定角转
> 最大相对离心力: 18,615 × g (15,000 rpm)
> 最大容量: 4 × PCR 排管或 32/0.2 mL PCR 单管
适用24个样本通量,可配气密性转子盖,冷冻型
> 适用1.5/2.0 mL 离心管(24x)
> 适用PCR 8 排管(4x)
> 最大离心力 (RCF)可达21,130×g(15,000 rpm)
> 适配气密性转子盖
> 独特边缘加宽转子,防止离心柱操作时管盖破碎
FA-24 x 2 气密性固定角转
> 最大相对离心力: 21,330 × g (15,060 rpm)
> 最大容量: 24 × 1.5/2.0 mL 离心管
> 气密性 Eppendorf QuickLock 快速锁定转子盖
FA-18 x 2 Kit 气密性离心柱固定角转
> 最大相对离心力: 18,565 × g (15,060 rpm)
> 加宽边缘设计,适合18x 离心柱的安全离心
> 气密性 Eppendorf QuickLock 快速锁定转子盖
适用于24个样本通量,可配气密性转子盖,非冷冻型
> 适用1.5/2.0 mL 离心管(24x)
> 适用 Eppendorf Tubes® 5.0 mL 离心管(10x)
> 适用 PCR 8 排管(12x)
> 最大离心力 (RCF)可达21,330×g(15,060 rpm)
> 适配气密性转子盖
> 独特边缘加宽转子,防止离心柱操作时管盖破碎
> 具有独特程序键3个,可快捷实现离心条件切换
FA-45-24-11Kit 气密性固定角转
> 最大相对离心力: 19,090 × g (13,200 rpm)
> 加宽边缘设计,适合24x 离心柱的安全离心
> 气密性,离心危险样品更安全
> Eppendorf QuickLock 快速锁定转子盖
FA-45-48-11 气密性固定角转
> 最大相对离心力: 18,210 × g (12,700 rpm)
> 最大容量:48 × 1.5/2.0 mL 离心管
> 气密性,离心危险样品更安全
> Eppendorf QuickLock 快速锁定转子盖
适用 48 个样本通量,可配气密性转子盖,可选冷冻型/非冷冻
> 适用 1.5/2.0 mL 离心管(48x)
> 适用 Eppendorf Tubes® 5.0 mL 离心管(16x)
> 适用 PCR 8 排管(8x)
> 适用 PCR 板/MTP/DWP(2x)
> 最大离心力 (RCF)可达 30,130×g(17,500 rpm)
> 适配气密性转子盖
> 适配独特边缘加宽转子,防止离心柱操作时管盖破碎
> 具有独特程序键5个,可快捷实现离心条件切换
适用与离心管,PCR板及深孔板离心,可配气密性转子盖,可选冷冻型/非冷冻
> 适用 1.5/2.0 mL 离心管
> 适用 Eppendorf Tubes® 5.0 mL 离心管(20x)
> 适用 PCR 8 排管(6x)
> 适用 PCR板/MTP(16x)
> 适用 DWP(4x)
> 最大离心力 (RCF)可达20,913×g(14,000 rpm)
> 适配气密性转子盖
> 适配独特边缘加宽转子,防止离心柱操作时管盖破碎
> 具有独特程序键 5个,可快捷实现离心条件切换
Safe-lock 带锁扣的 Eppendorf 原厂离心管 – 防止因离心、加热、混匀意外造成的爆管,防止样品泄露,保护操作人员健康。
在耗材选择时,我们也建议采用Eppendorf PCR clean或者更高级别的耗材,PCR clean级耗材不含人源DNA,不含DNase和RNase,有效避免提取过程中病毒RNA样品被RNase污染造成RNA降解不含PCR抑制剂防止PCR体系因为抑制而造成的假阴性的情况。
采用磁珠法可以比较方便的与自动化平台进行整合,Eppendorf的epMotion 5073t是一个比较合适的平台。该平台广泛的整合了各个厂家的磁珠法核酸提取试剂盒,而且该自动化平台充分考虑到了实验室避免交叉污染的需求。分液工具可以高温高压灭菌,2D-Mix技术避免和free-jet技术避免震荡和移液过程中发生溅液现象,非接触液面探测保证实验顺利进行的同时不产生交叉污染,并且可以选配CleanCap 对内部空间进行紫外灭菌杀毒。
> 可以自动完成病毒样品核酸提取工作和定量 PCR 体系构建工作
> 兼容不同厂家磁珠法病毒核酸提取试剂盒
> 减少实验人员在高危样品前暴露的风险
> 分液工具可以高温高压灭菌
> 具备紫外消毒灭菌功能(带 CleanCap 款)