如何正确接种细胞?

:转移细胞时,没有让细胞液重悬浮,细胞快速沉降,最终接种细胞数量会不一致。

:在细胞转移时,吹打细胞液使其均匀重悬,确保接种细胞数量一致,但要避免过度吹打,以免产生剪切力。

了解正确移液操作对于细胞接种过程中防止细胞重悬的重要性

转移细胞时,因为使用了普通移液器,导致出现气泡问题,细胞附着在气泡上,气泡破裂或者消失,造成细胞无法贴附继续生长,死亡。

培养基中气泡对细胞贴壁的影响

:用普通手动移液器加细胞液过程中,由于操作速度过快造成气泡产生,气泡会破坏细胞附着。

:移液需要进行练习,以避免气泡生成,注意消除吸头内的空气。

:使用外置活塞式分液器可以在不产生气泡的情况下转移易气泡液体。

在进行细胞换液操作时,探究最佳的移液技术

超净工作台内的无菌操作规范

:在超净台内杂乱摆放过多的器材,容易阻挡气道,形成湍流,造成层流气流对屏蔽污染物的效果大打折扣。

:工作范围如果过度拥挤,容易在在敞开容器上方移动您的手臂,这样会增加细胞污染风险。

:合理布局管理超净台内的设备和耗材摆放位置,划分不同的工作空间,有序操作,防止造成操作引发的污染情况。

:操作或使用完毕后立即闭合无菌容器。

如何在超净工作台内合理布局您的操作空间,避免污染问题

正确管理您的 CO₂ 培养箱

:培养箱门频繁开启关闭,箱内的细胞培养环境无法及时恢复,细胞生长受到干扰。

:合用的培养箱内样品放置随意,开门后需耗费时间寻找自己的样品,干扰箱内培养环境,还会造成混淆样品的风险。

:避免培养箱频繁开门,了解培养箱开门后参数恢复的速度,规划好样品摆放的位置并正确标记,做到培养箱门快开快关。

:合用的培养箱建议配置内分门,可减少开门后箱内环境的干扰,并妥善管理培养的样品,避免混淆和交叉污染的风险。

实验室中的 CO₂ 培养箱往往多人合用,规范管理使用可优化培养结果

CO₂ 培养箱的常规维护与消毒

:往培养箱中补水,如果只是直接往承液盘中倒入蒸馏水,污染物依旧会残留在盘内,让承液盘成为污染源。

:定期(每周1-2次)将承液盘整体移出,将残留的水清空,用70%的酒精或异丙醇容易擦拭消毒,待干燥后添加无菌蒸馏水,再放回培养箱内。

:不拆除培养箱内的搁板、搁架及水盘,直接用喷瓶对腔体内喷洒酒精,然后用布擦拭。

:拆除培养箱的搁板、搁架及水盘,将酒精喷洒于布上,再进行腔体的清洁,培养箱内尽量避免死角的存在,擦拭腔体内每个位置,再将移除的配件擦拭清洁后,安装到位。有条件的可过夜运行高温消毒程序。

注意 CO₂ 培养箱承液盘日常换水操作,通过运行高温消毒程序,可有效避免污染发生