正确使用移液器
1. 挑选合适的吸头
吸头和移液器同等重要,只有使用高质量的吸头才能完全体现移液器的精确性(推荐使用品牌原装吸头)。
就算是 10 μL 小体积吸头,Eppendorf 吸头尖端(左图)也是光滑无暇疵,其高度的均一性保证了实验结果的重现性。
2. 选择适合量程的移液器
移液器最大量程的 30%—100% 是最佳使用范围。
3. 装配吸头
将移液器吸嘴垂直插入吸头,轻压上紧,切勿上下敲击或左右摇晃,否则有可能损坏移液器内部零件。
Eppendorf 移液器具有弹性吸嘴功能,在降低装配/脱卸吸头用力的同时,确保吸头装配气密性且提高移液均一性。
4. 调节刻度
旋转刻度调节旋钮,从大量程调节至小量程,精度最佳;从小量程调节至大量程,最好先调至略大一点,再返回。
5. 吸取液体
a) 保证垂直吸液,根据流体静力压原理,移液器斜着吸液将使体积偏大。
b)吸头尽量浸没得浅一些,防止液体残留在吸头表面;但是同时要浸没得足够深,防止吸取空气。
c)至少预润湿 3 次,使得空气柱充满饱和的液体分子(特别是在移取易挥发性液体时)。
d)吸、放液体应该缓慢、匀速,以提高移液精准性。推荐使用电动移液器,电动马达驱动,减少人为误差,提供精准度。
e)吸取液体后稍稍停留一会儿(特别是对于大量程移液器)
6. 打出液体
放液时吸头尖端靠在容器内壁(特别是对于 20 μL 以下的体积),移液器角度 20°-45°。体积低于 10 μL 直接放液到容器底部
针对不同样品的正确移液技巧
注:反向吸液是指吸液时,将移液器的按钮直接按压到第二档再释放,这样会吸取比设定体积更多的液体; 打出液体时只需按到第一档即可。此时吸头内会有少量液体剩余,可以补偿吸头内部的表面吸附。
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